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当流速大于0.2mL/min时

时间: 2025-08-09 18:10:29 来源: magiciq.chieffocus.com 作者: 职场成长

（4）流速的超高测定选择

流速的改变会影响梯度洗脱时间和分离效果。试验考察了0.10～0.60mL/min范围间10种目标化合物的效液相色分离效果。当流速大于0.2mL/min时，谱法品添出峰时间提前，饮料容易造成各目标物之间分离度和峰型都不理想。中的种食当流速小于0.15mL/min时，加剂延长了目标物出峰时间，超高测定降低了工作效率。效液相色所以，谱法品添本试验选用0.15mL/min作为方法最佳流速。饮料

（5）梯度洗脱程序的中的种食选择

试验分析了流动相中甲醇初始比例对分离度的影响。当甲醇比例大20％时，加剂前4种目标化合物出峰较快，超高测定但色谱峰响应值低，效液相色易出现色谱峰重叠现象；当甲醇比例小于20％时，谱法品添各目标物出峰时间延长，并且峰形差，所以选择甲醇的初始比例为20％，0.02mmol/L乙酸铵的初始比例为80％。梯度洗脱程序运行到10min时，甲醇比例再重新回到20％，目的是稳定基线，方便下一个目标物实现更好的分离。

（6）柱温的选择

本试验考察了柱温在20℃～50℃范围间的检测结果，当T＜30℃时，各组分分离效果较差1当T＞30℃时，柱效降低。因此，选择30℃为最佳检测柱温温度。

在优化的实验条件下，10种食品添加剂在10min内能满足快速分离的需要，且分离度与灵敏度都较好。标准色谱图见图4。

三、标准曲线、检出限及精密度测定

1、标准曲线、检出限的测定

按优化好的试验条件对10种食品添加剂混合标准溶液系列进行色谱分析，以各组分的峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，并绘制标准曲线。结果表明，在0.050～50.0μg/mL范围内，10种食品添加剂的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数R2均大于0.999，以3倍信噪比(3S/N)计算方法检出限，方法检出限介于0.0017～0.0034μg/mL之间。标准曲线、相关系数、检出限及线性范围见表2。

2、精密度试验

本试验分别对5.0μg/mL、10.0μg/mL和40.0μg/mL三组浓度的混合标准溶液进行7次平行测定。如表3所示，测定低、中、高三组浓度的相对标准偏差(RSD)范围在0.69％～2.8％之间，表明本试验精密度良好。

四、样品前处理及样品分析

取10g饮料样品(精确称量至0.001g)于50mL具塞离心管中，加适量水，超声15min，用水定容至刻度，经高速离心机(4000r/min)离心10min，再用0.22μm微孔滤膜过滤，滤液供UPLC测定。

在样品上进行5.1μg/mL加标回收率试验，每组进行6次平行测定，并与传统液相色谱法进行对照分析，如表4所示，UPLC检测的各组分样品回收率在97.9％～101.1％之间，所有目标物的相对标准偏差均小于5.0％，且两种方法所得到的结果有良好的一致性。

五、结论

本方法采用超高效液相色谱法测定饮料中10种食品添加剂，在优化后的试验条件下，各组分在10min内可达到完全分离，且具有良好的线性关系，检出限为0.0017～0.0034μg/mL，样品加标回收率为97.9％～101.1％。此方法与传统液相色谱法相比，可大大缩短测定的分析时间，有效提高了检测效率，具有现实指导意义，为应用于食品中添加剂的检测奠定了基础。

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